ОТ ПЦР

ОТ ПЦР
Запрос «RT-PCR» перенаправляется сюда. Если вас интересует ПЦР в реальном времени (Real-time PCR), или количественная ПЦР (quantitative PCR), см. ПЦР в реальном времени.

В молекулярной биологии reverse transcription polymerase chain reaction сокращают как RT-PCR; ПЦР с применением обратной транскрипции, соответственно, как ОТ-ПЦР. Это метод амплификации специфического фрагмента рибонуклеиновой кислоты (РНК).

Одноцепочечную молекулу РНК превращают в реакции обратной транскрипции (ОТ, RT, reverse transcription) в комплементарную ДНК (cDNA) и далее амплифицируют уже одноцепочечную молекулу ДНК, используя традиционную ПЦР. RT-PCR (ОТ-ПЦР) не следует путать с Real-time ПЦР (Q-PCR), которую также иногда неверно сокращают как RT-PCR.

Описание метода

Для превращения последовательности РНК в комплементарную ДНК используют обратную транскриптазу:

1. Реакция первой цепочки:
Комплементарная ДНК (cDNA) образуется на матрице мРНК из dNTP ферментом обратной транскриптазой. Компоненты реакции смешиваются с ДНК-праймером и буфером с обратной транскриптазой на один час при 37°C.
2. Реакция второй цепочки:
После того как обратная транскрипция закончена и образована cDNA на матрице мРНК, следующие циклы производятся по стандартной методике ПЦР.

После около 30 циклов амплификации образуются миллионы копий нужной последовательности.

Использование ОТ-ПЦР

RT-PCR обычно используется при изучении ВИЧ, так как ВИЧ является ретровирусом и поэтому использует фермент обратную транскриптазу ВИЧ (HIV-Reverse Transcriptase) для синтеза вирусной ДНК, которая затем встраивается в геном хозяина.

Экспоненциальная амплификация при помощи ОТ-ПЦР является чувствительной методикой, с помощью которой может быть обнаружено малое количество молекул РНК. ОТ-ПЦР широко используется для диагностики генетических заболеваний и полуколичественного определения специфических молекул РНК в клетке или ткани как индикатор экспрессии соответствующих генов.

См. также


Wikimedia Foundation. 2010.

Игры ⚽ Поможем написать курсовую

Полезное


Смотреть что такое "ОТ ПЦР" в других словарях:

  • ПЦР правила — * ПЛР правілы * PCR rules правила, которым необходимо строго следовать при работе с использованием ПЦР метода. Эта необходимость продиктована высокой чувствительностью метода и требованием чистоты эксперимента, т. е. не допускать загрязнения… …   Генетика. Энциклопедический словарь

  • ПЦР-гибридизация in situ — * ПЛР гібрыдызацыя in situ * PCR in situ hybridization or PCR PRINS вариант ПЦР, т. е. полимеразной цепной реакции (см.), когда ДНК амплифицируется и выявляется на морфологически интактных клетках или тканях. Для этого клетки или ткань… …   Генетика. Энциклопедический словарь

  • ПЦР ISSR — * ПЛР ISSR * ISSR PCR or PCR of Inter Simple Sequence Repeats метод, суть которого заключается в том, что в качестве участков отжига праймеров используют микросателлитные локусы, а амплифицируют участки, находящиеся между их инвертированными… …   Генетика. Энциклопедический словарь

  • ПЦР-кариотипирование — * ПЛР карыятыпаванне * PCR karyotyping метод идентификации отдельных хромосом с использованием ПЦР () со специфическими праймерами (см.), напр., с последовательностями Alu семейства альфоидной ДНК и др …   Генетика. Энциклопедический словарь

  • ПЦР-технология — * ПЛР тэхналогія * PCR technology серия методов для амплификации (размножения) специфических сегментов ДНК и одновременно для модификации амплифицируемых последовательностей, напр., для введения мутаций при ПЦР мутагенезе и др. () …   Генетика. Энциклопедический словарь

  • ПЦР — См. Реакция цепная полимеразная (Источник: «Словарь терминов микробиологии») …   Словарь микробиологии

  • ПЦР-кариотипирование — Метод идентификации отдельных хромосом с использованием полимеразной цепной реакции со специфическими затравками (например, к последовательностям Alu семейства, альфоидной ДНК и др.). [Арефьев В.А., Лисовенко Л.А. Англо русский толковый словарь… …   Справочник технического переводчика

  • ПЦР — полимеразная цепная реакция …   Словарь сокращений и аббревиатур

  • ПЦР — Запрос «ПЦР» перенаправляется сюда. Cм. также другие значения. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)  экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой… …   Википедия

  • ПЦР с обратной транскрипцией — Запрос «RT PCR» перенаправляется сюда; если вас интересует ПЦР в реальном времени (Real time PCR), или количественная ПЦР (quantitative PCR), см. ПЦР в реальном времени. В молекулярной биологии метод полимеразной цепной реакции с обратной… …   Википедия

  • ПЦР в реальном времени — В молекулярной биологии, ПЦР в реальном времени (или количественная ПЦР, англ. Real time PCR, qPCR)  лабораторный метод, основанный на методе полимеразной цепной реакции, используется для одновременной амплификации и измерения… …   Википедия


Поделиться ссылкой на выделенное

Прямая ссылка:
… Нажмите правой клавишей мыши и выберите «Копировать ссылку»